蜂胶软胶囊中总黄酮测定方法

引言

蜂胶是由蜜蜂，特别是工蜂，从植物的树胶、树脂中采集，并与上颚腺、蜡腺等分泌物混合形成 的具有黏性的固体胶状物。现代研究结果表明，蜂胶含有维生素、酚类、蓓烯类、黄酮类化合物等多种营养保健成分。在蜂胶的众多活性物质中，黄酮类物质是最为关键的成分之一，它具有抗菌、杀毒、 消炎止痛、降血脂、促进机体组织再生和增强机体免疫能力等功效。近年来，蜂胶产品在市场上受到了广泛的关注和认可，其种类也日益丰富，主要以胶囊形式呈现。蜂胶中主要活性成分为黄酮类化合物，已成为研究热点，且市售的蜂胶胶囊类产品均以总黄酮含量作为评价指标。黄酮类化合物的测定有多种方法，如液相色谱法﹑分光光度法等，液相色谱法可以测定单一的黄酮成分，分光光度比色法可以测定黄酮成分的总量。 紫外分光光度法被广泛应用于测定蜂胶制品中的总黄酮含量，因为它具有操作简便、准确度高且易于实施的特点，因此深受广大研究者的青睐。

实验方法：根据《蜂胶中总黄酮含量的测定方法分光光度比色法》（GB/T 20574—2006），利用分光光度比色法对蜂胶软胶囊中的总黄酮进行定量分析。

试剂

芦丁标准品（含量95.5%，上海安谱璀世标准技术服务有限公司，批号 2251131）；

无水乙醇、硝酸铝、95% 乙醇、醋酸钾（分析纯，南京化学试剂有限公司）

仪器

UV-1800紫外可见分光光度计（上海美析仪器有限公司）；

超声波清洗仪；

高速台式离心机；

BT25S 十万分之一电 子天平、BSA224S-CW 电子天平。

试样的制备

称取蜂胶软胶囊内容物0.5g（精确至1mg）于烧杯中，加入95%乙醇约30 mL，室温下超声提取20min，将溶液转移至50mL的容量瓶中，加入95%乙醇至刻度线，混合均匀后进行过滤，弃去初滤液， 收集滤液待测。准确吸取1.0mL待测溶液于50mL容量瓶中，分别加入1.0mL硝酸铝溶液和1.0mL醋酸钾溶液，加95%乙醇至刻度，摇匀，静置10min，3 000 r·min-1离心3min，取上清液待测。空白实验精密吸取1.0mL待测溶液于50mL容量瓶中，加95%乙醇至刻度，摇匀。用1cm比色皿，在415nm以空白试液作参比，测定样品吸光度。

标准溶液制备

称取10.50mg芦丁标准品（含量95.5%）于50mL容量瓶中，用无水乙醇溶解，并定容至刻度，摇匀， 溶液浓度为0.2 g·L-1 。吸取标准溶液0mL、1.00mL、 2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL和6.00mL（相当于芦丁含量 0mg、0.2mg、0.4 mg、0.6mg、0.8mg、1.0 mg 和1.2 mg），分别置于50 mL容量瓶中，向容量瓶中加入1.0mL硝酸铝溶液和1.0mL醋酸钾溶液，用95%乙醇定容至刻度，摇匀，静置10 min后测定。

结果计算

总黄酮计算公式为

式中：X 为黄酮类化合物的总含量，%；

m1 为 由标准曲线上查出测定液中芦丁质量，mg；

m 为样品的质量，g；

d 为稀释比例。

仪器参数

UV-1800PC双光束紫外可见分光光度计

仪器特点

* UV－1800系列采用双光束光学系统，成功实现了高精度和高可靠性测量的完美结合，可满足各种应用的要求，可用在生物研究、生物工业、药物分析、制药、教学研究、环保、食品卫生、临床检验、卫生防疫等领域

* 宽广的波长范围，可满足各个领域对波长范围的要求

* 全自动的设计理念，实现了最简单的测量手段

* 大规模集成电路的设计大大提高了系统的扩展性和可靠性

* 改良优化的光路设计、进口光源和接收器造就了系统高性能和高可靠性

* 丰富的测量方法，具有波长扫描、时间扫描、多波长测定、多阶导数测定（选）、双波长、三波长（选）DNA蛋白质测量（选）等多种测量方法，可满足不同测量的要求，并可在6英寸大屏幕上直接显示

* 根据用户的要求可选配单孔架、手动四连架、手动八连架、自动八连架、玻璃支架、试管架、1cm比色架、5cm比色架、10cm比色架等

* 测量数据可通过打印机输出，具有USB接口

* 可断电保存测量参数和数据，方便用户使用

* 可通过PC软件控制实现光谱扫描等更精确和灵活的测量要求

技术指标及基本参数

* 波长范围：190～1100nm

* 光谱带宽：1.8nm

* 波长准确度：±0.3nm

* 波长重现性：≤0.1nm

* 透射比准确度: ±0.3% τ（0-100%τ）±0.002A(0～0.5A)   ±0.003A(0.5A～1A)

* 透射比重复性：±0.15% τ（0-100%τ）±0.001A(0～0.5A)   ±0.0015A(0.5A～1A)

* 杂散光：≤0.03% τ (220nm NaI，340nm NaNO2)

* 稳定性： 0.0005A/h（500nm预热后）

* 测光方式：透过率、吸光度、浓度、能量

* 波长调节：自动调节

* 光度范围： -4～4A

* 显示方式：六英寸高亮度液晶显示屏

* 检测器：进口硅光二极管

* 光源：进口氘灯，进口钨灯

* 电源： AC 220V/50Hz或110V/60Hz

* 功率： 120W

* 仪器尺寸：560×450×230mm

* 主机净重： 28Kg

关于我们

上海美析仪器公司简介

上海美析仪器有限公司(以下简称美析)，是一家具有自主知识产权的高新技术企业，美析的创业理念“科技——因你改变”，并以此为企业宗旨，不断探究、果敢创新。特别是在分析测试仪器领域，不断开发出先进的产品，使美析成为优质仪器资源的供应者。

美析主营光谱类仪器可见分光光度计、紫外可见分光光度计、原子吸收光谱仪、超微量分光光度计、原子荧光光度计、ICP 电感耦合等离子体发射光谱仪、ICP 电感耦合等离子体质谱仪，目前，我们的产品已广泛应用于有机化学、无机化学、生物化学、医药、环保、冶金、石油、农业等领域。同时美析利用在产品机械结构、光学设计、电气应用和软件开发方面积累的丰富经验，结合市场的最新实际需求，近期将陆续推出一批全新的分析类仪器。美析的总部及生产基地设在上海，营销中心设在北京，并在江苏、上海、山东三地建有研发基地。为充分利用各地的智力资源，美析与国内外的部分科研单位也进行了深层次的科研合作，不断将科研成果转化为生产力。为更好的服务于广大客户，美析仪器国内设有 12家办事机构，度身定制符合您需求的应用解决方案，提高产品的附加值。在不断服务国内用户的同时，美析也与 20 多个国家的分销机构建立了深度的战略合作关系。