可见分光光度法测定酒石酸泰乐菌素的含量
引言
酒石酸泰乐菌素是一种十六元大环内酯类抗生素,在水中溶解度很小,由于其分子中叔胺氮上有孤对电子,它可以与酸(如酒石酸)形成相应的盐类,提高其在水中的溶解度。酒石酸泰乐菌素的检测方法有微生物检定法、高效液相色谱法、紫外分光光度法等。近年来,共振光散射光谱法因其灵敏度高、操作简便,被广泛应用在生物、医药、环境等领域,但是还未见该方法在酒石酸泰乐菌素检测中的应用。虎红是一种荧光素类阴离子染料,已经被用于检测乳糖酸阿奇霉素、硫酸卡那霉素和阿米卡星,还被作为显色剂检测蛋白质,但还未见在酒石酸泰乐菌素检测中的应用。本团队研究发现,酒石酸泰乐菌素中的泰乐菌素阳离子能与虎红阴离子发生离子缔合反应生成有色离子缔合物,其最大吸收波长位于564nm处;二者发生离子缔合反应,还会使体系的共振光散射强度增大,谱峰位于315nm 处。基于上述离子缔合反应原理,本工作提出了可见分光光度法测定酒石酸泰乐菌素含量的方法,并应用于注射用酒石酸泰乐菌素样品的分析。
仪器与试剂
F-7000型荧光分光光度计;UV-1500型紫外可见分光光度计（上海美析仪器有限公司）;FA2204N型电子天平;pHS-3D型酸度计。
酒石酸泰乐菌素标准储备溶液:0.1g·L-1,取适量酒石酸泰乐菌素标准品,用水溶解和稀释,摇匀备用。使用时,用水稀释至所需的质量浓度。
虎红溶液:取适量虎红,加水稀释,配制成1×10-4mol·L-1 和5×10-4mol·L-1 虎红溶液,分别供共振光散射光谱法和可见分光光度法使用。
Clark-Lubs(克拉克-鲁布斯)缓冲溶液:取适量0.1mol·L-1邻苯二甲酸氢钾溶液、0.1mol·L-1盐酸溶液以及 0.1mol·L-1 氢氧化钠溶液,配制 pH3.0和pH3.4的 Clark-Lubs缓冲溶液,分别供共振光散射光谱法和可见分光光度法使用。
酒石酸泰乐菌素标准品纯度不小于98.5%;虎红、邻苯二甲酸氢钾、盐酸、氢氧化钠均为分析纯;试验用水为去离子水。试验用样品为2批市售的不同产地的注射用酒石酸泰乐菌素(标示量为2g·瓶-1)。
可见分光光度法
将样品原液用超纯水稀释2.5倍,得到样品稀释液。分取1.00mL 样品稀释液、0.75mLpH3.4Clark-Lubs 缓 冲 溶 液 和 2.50mL5×10-4mol·L-1虎红溶液置于10mL比色管中,混合后于室温反应30min,用水稀释至刻度,作为测定溶液;取0.75mLpH3.4Clark-Lubs缓冲溶液和2.50mL5×10-4mol·L-1虎红溶液置于10mL比色管中,混合后于室温反应30min,用水稀释至刻度,得到空白溶液。将测定溶液和空白溶液分别置于1cm 比色皿中,均以水作参比,在564nm 处测量空白、测定溶液的吸光度 A0 和 A,计算吸光度差值 ΔA=A-A0。
仪器参数
UV-1500PC紫外可见分光光度计
仪器特点
*采用单片微机控制，128*64位液晶显示
*宽大的液晶显示器可显示多组数据
*巨大的内存空间，可存储多组数据和曲线
*自动调0、调100%功能
*波长自动调节
*光源自动切换，滤色片自动切换
*宽大样品池（5mm～100mm）
*具有最多十点标样建标准曲线测量功能
*可通过直接输入K、B因子建立标准曲线进行定量测量
*可直接输入标样和对应浓度值建立标准曲线进行定量测量
*可断电保存测量设置的标准曲线参数
*配备通用并行打印接口，可打印标题栏、测量数据、曲线参数、曲线标准样品点和曲线
*配USB接口
*可通过PC软件控制实现光谱扫描等更精确和灵活的测量要求
技术指标及基本参数
*波长范围： 190～1100nm
*光谱带宽： 2nm
*波长准确度：±0.5nm
*波长重现性：≤0.2nm
*透射比准确度: ±0.3% τ
*透射比重复性：0.15% τ
*杂散光：≤0.05% τ (220nm NaI，340nm NaNO2)
*稳定性： 0.001A/h（500nm预热后）
*测光方式：透过率、吸光度、浓度、能量
*波长调节：自动调节
*光度范围： -0.3～3A
*显示方式： 128*64液晶
*检测器：进口硅光二极管
*光源：进口氘灯，进口钨灯
*电源： AC 220V/50Hz或110V/60Hz
*功率： 120W
*仪器尺寸：480×350×220mm
*主机净重： 15Kg
关于我们
上海美析仪器公司简介
上海美析仪器有限公司(以下简称美析)，是一家具有自主知识产权的高新技术企业，美析的创业理念“科技——因你改变”，并以此为企业宗旨，不断探究、果敢创新。特别是在分析测试仪器领域，不断开发出先进的产品，使美析成为优质仪器资源的供应者。
美析主营光谱类仪器可见分光光度计、紫外可见分光光度计、原子吸收光谱仪、超微量分光光度计、原子荧光光度计、ICP 电感耦合等离子体发射光谱仪、ICP 电感耦合等离子体质谱仪，目前，我们的产品已广泛应用于有机化学、无机化学、生物化学、医药、环保、冶金、石油、农业等领域。同时美析利用在产品机械结构、光学设计、电气应用和软件开发方面积累的丰富经验，结合市场的最新实际需求，近期将陆续推出一批全新的分析类仪器。美析的总部及生产基地设在上海，营销中心设在北京，并在江苏、上海、山东三地建有研发基地。为充分利用各地的智力资源，美析与国内外的部分科研单位也进行了深层次的科研合作，不断将科研成果转化为生产力。为更好的服务于广大客户，美析仪器国内设有 12家办事机构，度身定制符合您需求的应用解决方案，提高产品的附加值。在不断服务国内用户的同时，美析也与 20 多个国家的分销机构建立了深度的战略合作关系。
