紫外分光光度法测定清火栀麦片中栀子苷含量的不确定度评定

目的：建立紫外分光光度（UV）法测定清火栀麦片中栀子苷含量的方法，并对结果进行不确定度评定。

方法：采用UV法进行方法学验证并测定栀子苷含量，对测定结果进行不确定度评定，计算合成不确定度，最终给出测量结果。

结果：清火栀麦片中栀子苷经不确定度评定表明其含量测定结果在95%置信区间下的扩展不确定度为±1.724%（k=2）。

结论：建立的不确定度评定法能为紫外分光光度法测定中药复方制剂有效成分的不确定度分析提供参考。

1实验部分

1.1仪器与试剂

UV-1500PC型-紫外可见分光光度计（上海美析仪器有限公司），AUW220D型十万分之一电子天平（JapanSHIMADZU），AB104-N型万分之一电子天平（SwitzerlandMETTLERTOLEDO），BL6-189A型超声仪（ShanghaiBILON）。

栀子苷对照品（批号：110749-201919，质量分数为97.1%），购自中国食品药品检定研究院；清火栀麦片（市售，批号：210401、210503、210806）；甲醇（分析纯，上海振兴化工一厂），水为Milli-Q超纯水。

1.2方法与结果

1.2.1对照品溶液的制备

精密称取干栀子苷对照品适量，置于10mL量瓶中，加入色谱级甲醇适量，摇动使得对照品充分溶解，继续加入色谱级甲醇稀释至刻度，摇匀，即得质量浓度为0.8124mg/mL的对照品储备溶液。精密量取1mL对照品储备液置于25mL容量瓶中，用溶剂稀释至刻度，充分摇匀，即制备成对照品溶液。

1.2.2供试品溶液的制备

取清火栀麦片供试品20片，除去包衣，研细，精密称取粉末约0.15g，倒入50mL量瓶中，加入约40mL的甲醇溶液，超声处理30min，放冷，再用甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，精密量取续滤液1mL置于25mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，即制备成供试品溶液。

1.2.3测定方法

取不同浓度的对照品溶液和甲醇溶液，按照UV测定方法，在238nm的波长处测定上述各溶液的吸光度（A），以A为纵坐标，各溶液的浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线。取已制备的供试品溶液，按照标准曲线制备项下的测定方法，测定供试品中栀子苷吸光度（A），根据标准曲线计算得出供试品中栀子苷的含量。

2不确定度评估

2.1数学模型

根据UV测定原理，确定清火栀麦片中栀子苷含量的计算公式为：

式中，W为清火栀麦片中栀子苷含量；A为供试品溶液的吸光度；V1为供试品溶解体积；V2为供试品稀释体积；E为栀子苷的吸收系数；l为液层厚度；m为供试品称样量。

2.2含量测定

精密称取适量供试品，按照方法2.1所示配制成供试品溶液，用紫外分光光度计分别测得吸光度值，根据标准曲线来计算清火栀麦片样品溶液中栀子苷的含量

方法来源：[1]吴有根,陈燕军,刘娟.紫外分光光度法测定清火栀麦片中栀子苷含量的不确定度评定[J].品牌与标准化,2024,(05):26-28+33.

仪器参数

UV-1500PC型-紫外可见分光光度计

*采用单片微机控制，128*64位液晶显示
*宽大的液晶显示器可显示多组数据
*巨大的内存空间，可存储多组数据和曲线
*自动调0、调100%功能
*波长自动调节
*光源自动切换，滤色片自动切换
*宽大样品池（5mm～100mm）
*具有最多十点标样建标准曲线测量功能
*可通过直接输入K、B因子建立标准曲线进行定量测量
*可直接输入标样和对应浓度值建立标准曲线进行定量测量
*可断电保存测量设置的标准曲线参数
*配备通用并行打印接口，可打印标题栏、测量数据、曲线参数、曲线标准样品点和曲线
*配USB接口
*通过PC软件控制实现光谱扫描等更精确和灵活的测量要求（标配）